FM 2-10 是一种专门用于研究细胞膜动态、囊泡循环以及膜电位变化的亲脂性荧光探针。它属于styryl类荧光染料,是FM系列染料家族中较为短链且光谱特性偏向绿色区域的代表。由于其可逆性膜结合特性和对细胞膜活跃行为的敏感响应,FM 2-10 被广泛应用于神经元活动、细胞膜电位变化、囊泡内吞/外排过程以及膜流动性的研究中。
与其他FM染料相比,FM 2-10 的亲脂性较低,使其在膜中的插入深度浅,具有较快的结合和脱离动力学特征。因此,它更适合实时动态检测短时间内发生的细胞膜变化,尤其适合研究快速的电生理现象和短暂性的膜电位波动。
分子特性:FM 2-10 的分子结构带有带正电荷的季铵盐基团,使其在水溶液中水溶性良好,同时具备亲脂基团,可以嵌入细胞膜的外侧。
在未结合膜时,FM 2-10 在水相中呈现荧光强度;一旦与脂质膜结合,荧光立即增强。这一特性使其非常适合用于高对比度的细胞膜成像,避免非特异性背景干扰。
应用机制
FM 2-10 通过静电作用结合于细胞膜表面,尤其是带负电的磷脂头部区域。其荧光增强机制与染料从极性水相进入非极性膜相环境有关。与胞吞作用相关的膜区域会将FM 2-10 “内吞”进入细胞内部的囊泡,从而使研究者可以追踪膜泡的形成、内移及再循环等动态过程。
此外,由于FM 2-10对膜电位变化敏感,其在膜上的荧光强度会随膜电位的变化而轻微波动,这使得其在膜电生理研究中具有一定价值。
主要应用场景
神经元突触囊泡循环研究
FM 2-10 可以用于标记突触前膜,在刺激诱导神经元释放神经递质时,追踪囊泡的内吞和回收过程。其快速膜结合-脱离特性使其特别适用于高频刺激下的突触动态成像。
膜电位相关研究
虽然其灵敏度不及专门的电压敏感染料(如DiBAC系列),FM 2-10 仍可在一定条件下用于观察细胞去极化或复极化引起的膜荧光强度变化,适用于膜电位波动初筛实验。
细胞膜完整性与流动性研究
利用其在膜结合时增强荧光的特点,可用于检测细胞膜受损、膜修复以及膜蛋白介导的膜重构过程。
活细胞实时成像
由于染料非固定化、易漂洗的特点,FM 2-10 特别适用于活细胞短时荧光标记成像实验,适合高速荧光显微成像分析。
植物细胞膜染色
FM 2-10 在植物细胞中也被广泛用于观察质膜与内膜系统的动态变化,如细胞质流动、内质网膜泡运动等。
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