在细胞程序性终止的级联反应中,线粒体扮演着至关重要的“决策中心”角色。线粒体功能的早期改变,特别是线粒体膜电位(ΔΨm)的下降和线粒体通透性转换孔(MPTP)的开放,是凋亡早中期的核心事件,通常早于细胞核的形态学改变。

线粒体膜电位是维持线粒体正常功能(如ATP合成、离子平衡)的基础。当细胞受到凋亡信号刺激时,线粒体外膜通透性增加,内膜的质子梯度被破坏,导致膜电位崩溃。JC-1染料法是检测ΔΨm变化的经典方法。在线粒体膜电位较高时,JC-1以聚合体形式存在,发射红色荧光(~590 nm);当膜电位下降时,JC-1以单体形式存在,发射绿色荧光(~529 nm)。通过流式细胞仪或荧光显微镜检测红绿荧光的比例变化,即可灵敏地反映ΔΨm的水平。
MPTP是位于线粒体内外膜之间的一组蛋白复合物,其持续性开放会导致线粒体肿胀、外膜破裂,并释放细胞色素c等促凋亡因子进入胞质,从而不可逆地启动下游的凋亡执行程序。钙黄绿素AM(Calcein AM)与CoCl₂联用法是检测MPTP开放的有效手段。Calcein AM本身不发荧光,可穿透细胞膜进入细胞,被胞内酯酶水解为强绿色荧光的Calcein。正常情况下,Calcein可分布于细胞质和线粒体中。当加入CoCl₂后,Co²⁺能淬灭胞浆中的Calcein荧光,但无法进入线粒体。因此,如果MPTP未开放,线粒体内的Calcein荧光得以保留;若MPTP开放,Co²⁺进入线粒体淬灭其荧光,导致绿色荧光信号显著降低。
亚科因生物(Abbkine) 针对这两个关键节点,提供了经过严格验证的检测方案。其线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1法,货号:KTA4001) 经过优化,红绿荧光信号对比鲜明,能灵敏地检测到早期、细微的膜电位变化。而线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒则采用Calcein AM/CoCl₂原理,操作简便,结果直观可靠。这些试剂盒是研究心肌缺血再灌注损伤、神经退行性疾病、肿瘤耐药等与线粒体功能障碍密切相关领域的重要工具。
作为“赋能细胞研究与治疗”的坚定推动者,Abbkine始终专注于细胞分析检测领域,其自主研发的细胞代谢与状态检测产品线,旨在帮助研究者精准捕捉细胞内部的动态变化,为揭示疾病机制和开发干预策略提供坚实的数据支撑。